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尺寸排阻色譜柱擁有哪些作用呢?你可知曉?

更新時(shí)間:2024-10-24點(diǎn)擊次數:515
  尺寸排阻色譜柱是一種廣泛應用于生物分析領(lǐng)域的工具,其工作原理主要基于分子大小差異進(jìn)行分離。利用柱內固定相中孔隙與分子間的物理作用來(lái)實(shí)現分離。具體來(lái)說(shuō),聚合物分子在柱子中的孔道中被篩選,較大的分子無(wú)法通過(guò)尺寸較小的孔道,只有較小的分子才能通過(guò)這些孔道,從而實(shí)現不同分子尺寸的分離。其優(yōu)點(diǎn)在于其分離速度快、操作簡(jiǎn)單、分離效果好。此外,該技術(shù)不依賴(lài)于分子之間的親和性或化學(xué)性質(zhì),因此適用于各種生物大分子,如蛋白質(zhì)、多肽和核酸等的分離。
  尺寸排阻色譜柱的作用主要體現在以下幾個(gè)方面:
  1、分離純化:能夠根據分子的大小差異進(jìn)行分離,廣泛應用于蛋白質(zhì)、核酸、多糖等生物大分子的分離純化。例如,在蛋白質(zhì)分離純化過(guò)程中,通過(guò)尺寸排阻色譜柱可以將不同大小的蛋白質(zhì)分子分離開(kāi)來(lái),從而實(shí)現目標蛋白的純化。
  2、分子量測定:利用尺寸排阻色譜柱可以對蛋白質(zhì)、聚合物等分子的分子量進(jìn)行測定。通過(guò)將已知分子量的樣品注入色譜柱,根據其洗脫時(shí)間與保留時(shí)間的關(guān)系繪制校正曲線(xiàn),進(jìn)而可以確定未知樣品的分子量。
  3、聚集體分析:在藥物研發(fā)和質(zhì)量控制中,可用于分析蛋白質(zhì)、抗體等生物制品中的聚集體情況。通過(guò)對聚集體的分析,可以評估生物制品的穩定性和安全性。
  4、結構表征:當尺寸排阻色譜柱與其他檢測技術(shù)(如光散射、粘度計等)相結合時(shí),可以提供關(guān)于大分子結構、構象、聚集以及支化等方面的信息。這對于研究生物大分子的結構特征和功能具有重要意義。
  5、樣品凈化:還可以用于去除樣品中的鹽分、小分子雜質(zhì)等,實(shí)現樣品的凈化。這在生物制藥領(lǐng)域尤為重要,因為高純度的樣品對于后續的研究和應用至關(guān)重要。
  6、濃縮和脫鹽:由于尺寸排阻色譜柱的工作原理基于分子大小的差異,因此它也可以實(shí)現樣品的濃縮和脫鹽處理。這對于需要進(jìn)一步分析和研究的樣品來(lái)說(shuō)非常有用。

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