氨基酸分析柱是一種專(zhuān)門(mén)設計用于分離和分析氨基酸成分的色譜柱,它通常應用于高效液相色譜(HPLC)或液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用(LC-MS)技術(shù)中。其核心在于其內部填充的固定相材料,這種材料的選擇對于分析柱的性能至關(guān)重要。常用的固定相材料包括硅膠、聚合物和碳材料等,其中硅膠基柱由于其高機械強度和良好的化學(xué)穩定性,被廣泛應用于氨基酸分析。通過(guò)在硅膠表面鍵合不同的官能團,如C18、C8等,可以調節柱子的選擇性和保留性能。
使用氨基酸分析柱的操作指南:
1、校準儀器
校準是確保儀器精度和可靠性的重要過(guò)程。在進(jìn)行氨基酸測定之前,必須根據儀器規格和生產(chǎn)商的指南進(jìn)行校準。校準過(guò)程可能涉及使用標準物質(zhì)或參考樣品進(jìn)行比較,并根據差異進(jìn)行調整。
2、處理樣品
根據測定需求,樣品可能需要經(jīng)過(guò)不同的處理。例如,測定樣品中各種游離氨基酸含量時(shí),可以除去脂肪雜質(zhì)后,直接上柱進(jìn)行分析。而測定蛋白質(zhì)的氨基酸組成時(shí),樣品必須經(jīng)酸水解,使蛋白質(zhì)變成氨基酸后才上柱進(jìn)行分析。
3、加入試劑
在加樣前,準備好測定過(guò)程中所需的試劑和溶液,并將其添加到適當的儀器部件中。
4、啟動(dòng)測定
完成樣品和試劑的準備后,將樣品注入到儀器中并啟動(dòng)測定程序。此時(shí),儀器會(huì )自動(dòng)執行反應,并根據反應的結果輸出氨基酸含量數據。
5、分析結果
收集完測定數據后,進(jìn)行分析。如果數據與預期結果不符,則需要查找原因并重新調整測定條件或樣品處理方法。最終,根據數據得出有關(guān)樣品中氨基酸含量的結論。
6、日常維護
定期檢查儀器電源、數據上傳和采集系統,確保其正常工作。每日清理離心管、樣品板、曲線(xiàn)器等樣品接觸面,以確保精度和準確性。定期檢查探測器、泵、泵頭等部件,確保其正常工作。
7、常規保養
根據設備說(shuō)明書(shū),定期更換使用壽命到期或失效的部件和耗材,如管路、氣體凈化器、O環(huán)等。定期進(jìn)行校準和驗證等操作,以保證結果的準確性和可靠性。定期做一次樣品運行,以確保儀器性能穩定并正常運轉。
8、清潔與保養
使用布或棉紗清潔儀器表面時(shí),應避免碰撞、切割和使用重質(zhì)溶劑。同時(shí),定期清洗純水槽和水箱,并及時(shí)清除各個(gè)儀器箱內的灰塵和雜物。